tRNA是非編碼RNA，它們通過自身的反密碼子識別mRNA上的密碼子，并將相應的氨基酸轉移到核糖體中的多肽鏈上。近年來發現tRNA衍生的小RNA（tsRNA，tRF）在諸多疾病（如腫瘤，神經退行性疾病，代謝性疾病）中發揮著重要作用，引起了廣泛的關注。該研究方向尚處于起始階段，大概率會像其他非編碼RNA一樣成為國自然中標大戶。

今天我們來講一篇血漿中tRF用于診斷早期乳腺癌（EBC）的文章，題名為：Plasma tRNA Fragments Derived from 5' Ends as Novel Diagnostic Biomarkers for Early-Stage Breast Cancer（IF=7.032）。該文章通過提取血漿外泌體并分離tRF，通過比較差異tRF用于診斷乳腺癌。

血漿tRF分析

本研究共納入316個血漿樣本（176例EBC和140個NCs患者）和35個配對組織。利用高通量測序用于篩選差異表達的tRF，根據差異倍數和p值選擇30個顯著差異的tsRNA，大樣本檢驗后發現，EBC患者血漿樣品中6個tRF在的表達水平低于對照組。tRF-Glu-CTC-003, tRF-Gly-CCC-007, tRF-Gly-CCC-008, tRF-Leu-CAA-003, tRF-Ser-TGA-001和tRF-Ser-TGA-002在EBC患者血漿中表達下調。

tRF與臨床病理特征之間的關聯

與NCs相比，浸潤性BC患者血漿樣品中6種tRF的表達水平始終較低。tRF-Gly-CCC-008, tRF-Leu-CAA-003和tRF-Ser-TGA-002在原位乳腺癌患者血漿中的含量低于NC患者（p值分別為0.036、0.029和0.040）。這6個tRF可以區分NC患者有無淋巴結轉移的患者，但與轉移性和非轉移性淋巴結的患者相比沒有統計學差異。上述tRF還能用于區分EBC亞型和腫瘤分期.

確定的tRF的預后價值

為了分析無病生存率（DFS）和總生存率（OS），進行了對數秩檢驗。根據表達水平將患者分為高表達組和低表達組。tRF-Glu-CTC-003表達水平低的HER2+患者的DFS和OS似乎比高表達水平的患者更差。

tRF在細胞上清液，血漿外泌體和腫瘤組織中的表達

在細胞上清液中檢測了這6種tRF的表達水平，每種tRF在至少5種BC細胞系中的表達低于人乳腺上皮細胞系MCF-10A。24例EBC和16例NCs患者血漿樣本中分離的外泌體的表達水平。tRF-Ser-TGA-001和tRF-Ser-TGA-002在EBC患者的血漿外泌體中的水平顯著低于NC。為了研究血漿和組織樣品之間的相似性，評估了35種配對的BC組織中六種tRF表達，在BC組織中的表達明顯低于正常組織。

tRF生物信息學分析

結果圖中顯示tRF在其各自trna的三葉草二級結構上的位置。tRF-Gly-CCC-007和tRF-Gly-CCC-008的結構相似，tRF-Ser-TGA-001和tRF-Ser-TGA-002也是如此。tRF通過與它們的靶點結合進入AGO復合體，tRF靶AGO復合體的解剖結構與microRNA靶AGO復合體相似。tRF與AGO家族的蛋白質特別是AGO1、3和4有著緊密聯系。我們使用TargetScan預測程序預測靶基因。然后進行基因本體（GO）分析，包括分子功能、生物過程和細胞成分的評估。tRF-Glu-CTC-003和tRF-Leu-CAA-003的靶基因，如AKT1和MYD88，主要是細胞內的，參與生物合成和分解代謝過程。對于tRF-Gly-CCC-007和tRF-Gly-CCC-008，CDC42是靶基因，主要存在于細胞內細胞器中，其關鍵分子功能是參與Ras和Rho-GTPase結合，主要的生物學過程是GTPase活性的調節。Tsr-002的蛋白結構與TsA-002緊密相關。京都基因與基因組百科全書（KEGG）分析表明，靶基因的信號通路主要包括AMPK信號通路、TNF信號通路和FoxO信號通路。為了探索內在機制，利用STRING數據庫建立了這些基因的蛋白質-蛋白質相互作用（PPI）網絡。