肝巨噬細胞可以被許多因素激活，巨噬細胞向促炎表型（M1）極化是非酒精性脂肪肝疾病（NAFLD）進展中的一個重要事件。外泌體可通過轉移各種生物成分介導細胞間的通訊，外泌體是否參與肝細胞與巨噬細胞之間的通訊，進而影響NAFLD疾病進展， Hepatology新發表的一篇文章告訴你答案。

思維路線：

結果：
1. 血清miR-192-5p與NAFLD病理特征相關
   NAFL和NASH患者的血清miR-192-5p水平均高于對照組, 與ALT和AST水平呈正相關。

2. 血清miR-192-5p水平與肝巨噬細胞激活相關
   HFHCD喂養大鼠，第4周出現肝脂肪變性，第8周患上脂肪性肝炎。血清miR-192-5p與疾病進展相關。檢查大鼠肝CD68 + CD86 + M1細胞，發現第8周CD68 + CD86 + M1的數量顯著增加，M1特異性細胞因子如iNOS、IL-6、TNF-α也增加。相反，M2型巨噬細胞的標志物Arg1表達水平降低。

3. 脂毒性肝損傷時肝細胞源性外泌體miR-192-5p增加
   從NASH患者中分離出血清外泌體大小分布為50-200 nm，典型尺寸約為100 nm。表達成熟外泌體標記CD63和CD81，還表達肝細胞標記蛋白ASGPR1和CYP2E1。測量NASH患者血清中的外泌體數量，發現NASH患者和HFHCD喂養大鼠均向血清中釋放更多外泌體，PA處理的人肝癌細胞系還釋放出更多外泌體。表明在肝脂毒性損傷的情況下，肝細胞釋放出更多外泌體。NASH患者、HFHCD喂養大鼠、PA處理的HepG2細胞中分離出的外泌體含有更多的miR-192-5p。

4. 脂毒性肝細胞源性miR-192-5p誘導巨噬細胞的激活
   THP-1巨噬細胞在6小時后可有效攝取肝細胞來源的外泌體，PA處理的HepG2細胞衍生的外泌體劑量依賴性增加THP-1巨噬細胞中的miR-192-5p水平，iNOS，IL-6、TNF-α的上調和CD11b + CD86 +細胞增加都顯示出M1巨噬細胞活化， M2巨噬細胞不受影響。

5. Rictor是THP-1巨噬細胞中miR-192-5p的直接靶標
   序列比對表明miR-192-5p具有野生型Rictor的3’UTR結合位點，Rictor是炎癥和免疫反應的重要調節劑。熒光素酶報道基因實驗顯示，miR-192-5p的過表達抑制野生型Rictor的活性，miR-192-5p抑制劑增加野生型Rictor的熒光素酶活性，對突變型Rictor 無影響。miR-192-5p的過表達抑制Rictor蛋白的表達，miR-192-5p抑制增加Rictor的表達。miR-192-5p的過表達降低p-Akt水平，抑制miR-192-5p則增加p-Akt水平。PA處理HepG2細胞來源的外泌體也顯著降低THP-1細胞中Rictor蛋白的水平，可被miR-192-5p抑制劑逆轉。

6.外泌體miR-192-5p是PA介導的M1巨噬細胞激活的關鍵因素
   miR-192-5p可增加M1巨噬細胞標記基因（iNOS、IL-6、TNF-α），但不影響M2巨噬細胞標記基因表達，CD11b + CD86 +細胞顯著增加，CD11b + CD206 +細胞沒有變化。表明在THP-1巨噬細胞中miR-192-5p的過表達顯著誘導M1極化。THP-1細胞中敲低Rictor也誘導M1巨噬細胞激活。NASH患者的血清外泌體誘導iNOS增加3倍，IL-6增加10倍，TNF-α增加2倍，這種增加可被miR-192-5p抑制劑阻斷。

7.miR-192-5p對RICTOR / AKT / FOXO1信號的影響
   FoxO1和糖原合酶激酶3β（GSK3β）都是Rictor / Akt1信號通路重要的下游靶標。miR-192-5p的過表達降低p-FoxO1表達水平，但不影響p-GSK3β。敲除Rictor會降低p-FoxO1和p-GSK3β在THP-1細胞中的表達。miR-192-5p在抑制HepG2細胞中Rictor / Akt1 / FoxO1信號傳導方面具有與PA處理相似的作用。PA處理或miR-192-5p模擬物可降低Rictor、p-Akt和p-FoxO1的蛋白質水平。

總結：
   肝細胞源性外泌體miR-192-5p在炎癥性巨噬細胞激活中起關鍵作用，可以通過Rictor / Akt / FoxO1信號通路誘導巨噬細胞激活，調節NAFLD疾病進展。血清外泌體miR-192-5p代表NAFLD / NASH疾病潛在的非侵入性的生物標志物和治療靶標。